انتخاب اختصاصی فاژهای حاوی قطعه آنتی بادی به کمک پروتئین a در تکنیک کتابخانه آنتی بادی فاژ

Authors

رضا ولدان

reza valadan institute of biotechnology, ferdowsi university of mashhad, mashhadپژوهشکده زیست فن آوری، دانشگاه فردوسی مشهد، مشهد علیرضا رفیعی

alireza rafiei molecular and cell biology research center, faculty of medicine, mazandaran university of medical sciences, sariمرکز تحقیقات بیولوژی سلولی و مولکولی، دانشگاه علوم پزشکی مازندران، ساری غلامرضا هاشمی تبار

gholamreza hashemitabr department of pathobiology, faculty of veterinary medicine, ferdowsi university of mashhad, mashhadگروه پاتوبیولوژی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه فردوسی مشهد، مشهد محمدرضا باسامی

mohammad reza bassami department of clinical sciences, faculty of veterinary medicine, ferdowsi university of mashhad, mashhadگروه علوم درمانگاهی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه فردوسی مشهد، مشهد

abstract

سابقه و هدف: تکنیک کتابخانه آنتی بادی فاژ یکی از قدرتمندترین روش های ساخت قطعات آنتی بادی در محیط آزمایشگاه است. با این حال یکی از مشکلات تکنیکی در مسیر انتخاب آنتی بادی های اختصاصی و عملکردی وجود فاژهای فاقد قطعه آنتی بادی در کتابخانه آنتی بادی فاژ است. هدف از این مطالعه استفاده از قابلیت اتصال کلون های موجود در کتابخانه آنتی بادی فاژ به پروتئین a برای خالص سازی فیزیکی فاژهای حاوی قطعه آنتی بادی از فاژهای فاقد قطعه آنتی بادی است. مواد و روش ها: کتابخانه آنتی بادی فاژ tomlinson طبق پروتکل مربوطه تکثیر شد. انتخاب آنتی بادی علیه گیرنده her2 در سطح سلول vero انجام شد. سه چرخه panning در دو گروه صورت گرفت به صورتی که در یک گروه قبل از هر چرخه panning فاژهای تولید شده به وسیله پروتئین a متصل به آگاروز خالص سازی شدند، در حالی که در گروه کنترل مرحله خالص سازی با پروتئین a صورت نگرفت. آنتی بادی های به دست آمده در انتهای هر چرخه در دو گروه مورد مطالعه به وسیله pcr و phage-elisa مورد ارزیابی قرار گرفت. یافته ها: نتایج آزمون pcr نشان دهنده افزایش قابل ملاحظه تعداد فاژهای حاوی قطعه آنتی بادی پس از خالص سازی توسط پروتئین a در انتهای چرخه سوم panning (87 درصد) نسبت به گروه کنترل (41 درصد) است. بعلاوه نتایج آزمون الیزا نیز تأیید انتخاب و تکثیر اختصاصی آنتی بادی در گروه فاژ خالص شده با پروتئین a است. استنتاج: این مطالعه اهمیت خالص سازی فاژهای حاوی قطعه آنتی بادی را برای تولید و انتخاب آنتی بادی های اختصاصی را در تکنیک کتابخانه آنتی بادی فاژ نشان می دهد.

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

انتخاب اختصاصی فاژهای حاوی قطعه آنتی‌بادی به کمک پروتئین A در تکنیک کتابخانه آنتی‌بادی فاژ

Background and purpose: Antibody phage display library is a powerful in vitro technology for production of recombinant antibody fragments against a wide variety of antigens. However, the presence of insert-free clones in the phage libraries limited the specific enrichment of antibody fragments in many studies. The aim of this study was to protein A-aided recovery of insert-containing phages in ...

full text

جداسازی قطعات مناطق متغیر آنتی بادی تک زنجیره ای (scFv) علیه فاکتور نکروز دهنده تومور آلفا (TNF-?) از کتابخانه آنتی بادی فاژی

خلاصهسابقه و هدف: سایتوکاین تراپی، یکی از راهکارهای اصلی برای کنترل بیماری های التهابی شدید است. با توجه به اهمیت TNF-? در بسیاری از بیماری های التهابی و اتو ایمیون، این سایتوکاین یک هدف جذاب برای بسیاری از محققین بوده و بعنوان یکی از کاندیدهای مهم برای سایتوکاین تراپی مطرح است. یکی از راهکارهای مقابله با آثار زیانبار TNF-? استفاده از آنتی بادی های مونوکلونال است. یکی از تکنیک های مهم برای ت...

full text

تولید فاژهای نوترکیب حاوی ژن های آنتی بادی اختصاصی ویروس تریستزای مرکبات

ویروس تریستزا یکی از عوامل بیماریزای مرکبات در دنیا به شمار می رود. امروزه روش های نوین مبتنی بر مهندسی آنتی بادی به عنوان راهکاری جدید در شناسایی گیاهان آلوده و همچنین تولید گیاهان مقاوم به بیماری ها مورد استفاده قرار می گیرد. یکی از ابزار های مهم در تولید آنتی بادی های نوترکیب استفاده از تکنولوژی نمایش فاژی می باشد. در این تحقیق قابلیت استفاده از کتابخانه فاژی حاوی ژن های آنتی بادی انسانی به ...

full text

استفاده ازتکنولوژی پروتئین نوترکیب برای تهیه آنتی بادی اختصاصی علیه ناقل بیماری رایزومونیا در چغندرقند

بیماری ریشه‌گنایی )رایزومانیا ( از مهمترین بیماری‌های ویروسی چغندر¬قند می‌باشد. عـامـل این بیماری ویروس رگبرگ زرد نکروتیک چغندر قند می¬باشد. قارچ Polymyxa betae به عنوان تنها ناقل طبیعی این ویروس شناخته شده است. با توجه به ماهیت پارازیت اجباری ناقل و عدم قابلیت کشت در آزمایشگاه، شناسایی گیاهان آلوده معمولا بر اساس مشاهده میکروسکوپی انجام می¬شود. در این تحقیق به منظور تسهیل در روند شناسایی، آنتی...

full text

استفاده ازتکنولوژی پروتئین نوترکیب برای تهیه آنتی بادی اختصاصی علیه ناقل بیماری رایزومونیا در چغندرقند

بیماری ریشه‌گنایی )رایزومانیا ( از مهمترین بیماری‌های ویروسی چغندر¬قند می‌باشد. عـامـل این بیماری ویروس رگبرگ زرد نکروتیک چغندر قند می¬باشد. قارچ Polymyxa betae به عنوان تنها ناقل طبیعی این ویروس شناخته شده است. با توجه به ماهیت پارازیت اجباری ناقل و عدم قابلیت کشت در آزمایشگاه، شناسایی گیاهان آلوده معمولا بر اساس مشاهده میکروسکوپی انجام می¬شود. در این تحقیق به منظور تسهیل در روند شناسایی، آنتی...

full text

پاسخ آنتی بادی به استرپتوکیناز

چکیده زمینه: استرپتوکیناز در حمله حاد میوکارد تجویز می گردد و از استرپتوکوک های بتاهمولیتیک تهیه می شود. وجود این آنتی بادی ها در بعضی از افراد ممکن است استفاده از استرپتوکیناز را تحت تأثیر قرار دهد. هدف: این مطالعه به منظور تعیین دامنه آنتی بادی های ضد استرپتوکیناز در یک جمعیت سالم و بررسی تغییرات این آنتی بادی ها در بیماران دچار حمله حاد میوکارد که تحت درمان با استرپتوکیناز قرار می گیرند، ان...

full text

My Resources

Save resource for easier access later


Journal title:
مجله دانشگاه علوم پزشکی مازندران

جلد ۲۴، شماره ۱۲۰، صفحات ۴۳-۵۳

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023